非接觸式超聲波細胞破碎儀
杯式超聲波破碎儀 Lawson08-II用于無菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細胞。帶消音壓緊裝置,可選配DL-1510型低溫冷卻液循環(huán)機。
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杯式超聲波破碎儀 Lawson08-II用于無菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細胞。帶消音壓緊裝置,可選配DL-1510型低溫冷卻液循環(huán)機。
LAWSON98-V非接觸式超聲波粉碎機,也叫杯式破碎,用于無菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細胞。專為二代測序DNA樣本與染色質免疫共沉淀實驗樣本前處理量身訂做,相比傳統(tǒng)的探頭接觸式超聲波細胞粉碎機,非接觸式樣品可在密封容器下進行破碎,不產生感染性飛霧,超聲波探頭與樣品不接觸,避免交叉污染。非接觸式超聲波粉碎機可獲得傳統(tǒng)超聲方式無可比擬的質量、效率和安全性。
一次可同時檢測多個樣品,實驗效率高;無磨損,掉渣現(xiàn)象,各樣品均在單獨的全封閉試管中,避免交叉污染;可選配冷卻水循環(huán)系統(tǒng),便于樣品在4℃水浴超聲波,能量分布均勻,超聲作用完全;超聲參數設置靈活,實驗步驟標準化,實驗重復性好,結果可靠性高。
逐漸成為ChIP(染色質免疫共沉淀)和DNA剪切研究平臺不可缺少的標準化工具。實驗效率高、結果可靠、重復性佳,最低可處理5ul的樣本,適用珍貴的樣本。
⒈無氣霧浮質產生—增強生物安全性(如分支桿菌、病毒等)
⒉消除了樣品交叉污染的危險
⒊消除了傳統(tǒng)的探頭磨損掉渣現(xiàn)象
⒋可處理多種樣品,樣品處理范圍廣泛
⒌適用于各種標準容器
⒍可用于處理微量樣品,最小到5ul
⒎自動的連續(xù)旋轉離心管則使超聲波的能量分布更為均勻
⒏可選配高低溫恒溫水浴槽、按照客戶需求定制各種直徑的Eppendorf管破碎旋轉基座
型號 | Lawson08-II |
頻率 | 19.5-20.5KHz |
功率 | 3200W |
功率調節(jié)范圍 | 450--3200W連續(xù)可調 |
時間控制精度 | ±1%任意設定 |
工作次數設定 | ±1%任意設定 |
超聲時間設定 | 1—99次,數碼顯示 |
間隙時間設定 | 1—99次,數碼顯示 |
變幅桿末端直徑 | Φ30 |
破碎容量 | (0.1-2ml)×16 |
占空比 | 1-99% |
電源 | 220/110V 50Hz/60Hz |
工作環(huán)境 | 0--32℃,RH80,760±30mmHg |
換能器組件約 | 18kg |
換能器重量 | 24kg |
發(fā)生器尺寸 | 140×330×210mm |
超聲波發(fā)生器 | 一臺 |
振動系統(tǒng)(換能器組件) | 一只 |
管子 | 十六根 |
十字夾(在隔音箱內) | / |
試管夾(在隔音箱內) | 一只 |
電源線 | 一根 |
專用扳手(用于拆卸變幅桿) | / |
保險絲 | 四只 |
使用說明書 | 一份 |
合格證 | 一張 |
保修卡 | 一份 |
細胞破碎的方法:
一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關,空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經出口管流出。此過程中細胞經歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。
這是一種溫和的、徹底破碎細胞的較理想的方法。
3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。
三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來。
細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。
使用前注意事項:
1.根據所處理的樣本體積選擇適當探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應超過10秒;
3.使用前準備好冰盒,樣品處理時必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。